是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。現代液相色譜儀由高壓輸液泵、進樣系統、溫度控制系統、色譜柱、檢測器、信號記錄系統等部分組成。與經典液相柱色譜裝置比較,具有、快速、靈敏等點。
系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數,在兩相中作相對運動時,經過反復多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數據以圖譜形式打印出來液相色譜儀主要有進樣系統、輸液系統、分離系統、檢測系統和數據處理系統,下面將分別敘述其各自的組成與點。
液相色譜的主要組成部分包括溶劑供給系統、混樣系統、色譜柱、檢測器以及數據處理系統。
1.溶劑供給系統:液相色譜的核心之一是溶劑供給系統,它提供高壓的流動相(溶劑),將樣品注入色譜柱。溶劑供給系統包括泵、儲液罐和壓力傳感器等,確保流動相的穩定性與流速。
2.混樣系統:在該系統中,樣品通過注射器或自動進樣器加入到流動相中。樣品通常溶解在適當的溶劑中,并經過混合后輸送至色譜柱。
3.色譜柱:色譜柱是液相色譜的關鍵部分,內充填有固定相(常見為硅膠顆粒)。當樣品進入色譜柱時,流動相與樣品中的各組分發生相互作用。由于不同化學成分與固定相的親和力不同,樣品中的各組分將在色譜柱中以不同的速率被分離。
4.分離原理:色譜分離基于樣品組分在流動相與固定相之間的分配系數差異。每種化合物與固定相的結合力不同,因此它們在色譜柱中的停留時間(滯留時間)也不同。較強親和力的組分在色譜柱內停留時間長,較弱親和力的組分則較早被洗脫出來。
5.檢測器:當各組分通過色譜柱后,檢測器負責對其進行分析。常見的檢測器有紫外檢測器(UV)、熒光檢測器、折光檢測器等。根據樣品組分的特性,選擇不同的檢測器進行定性和定量分析。
6.數據處理系統:通過檢測器得到的信號經由計算機系統進行處理,生成色譜圖。色譜圖中,橫坐標為時間(或流動相的體積),縱坐標為信號強度。通過色譜圖,可以對樣品的成分進行定性和定量分析。